الفهرس 
LIST OF CONTENTSOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 161 |  |  |
| | | from | 161 | | |
Abstract
الملوثات الكيميائية مثل السموم الفطرية والمعادن الثقيلة، وتحديداً الأفلاتوكسين 1M، الأوكراتوكسين أ ، الرصاص والكادميوم التى قد تتواجد فى الألبان نتيجه تلوث مياه الشرب والاعلاف وأثناء عملية الإنتاج أو معالجة منتجات الألبان أو تعبئتها وهى مواد شديدة السمية نظرا لارتباطها بمجموعة متنوعة من الأضرار الصحية ،بالاضافة الى أنها مقاومة لعمليات الحرارة مثل البسترة والتعقيم.
بالنظر إلى ذلك ، كان الهدف من هذه الدراسة هو فحص مستويات هذه الملوثات فى عينات اللبن وكذلك طرق إزالة التلوث باستخدام مواد ماصة فعالة وغير مكلفة مثل البنتونيت ونوى التمر وجسيمات الشيتوزان النانوية مع التركيز على تأثيرها على جودة الحليب. بعد ذلك ، تم اختبار المواد المستخدمة بتركيزين لتأثيرها على كريات الدم الحمراء لتقييم أي ضرر محتمل. تم تنفيذ التجربة بالطريقة الموضحة أدناه:
تجميع عينات اللبن
تم اختيار 35 عينة لبن بقرى (15 خام و 20 مبستر) بشكل عشوائي من مزارع الألبان ومحلات الألبان العامة المنتشرة في محافظة القليوبية. تم ترقيم العينات بشكل صحيح ، ونقلها إلى المختبر في أنابيب نظيفة وجافة من مادة البولي بروبيلين ، وتم الاحتفاظ بها عند ̶ 20 درجة مئوية حتى يحين التحليل.
الكشف عن السموم الفطرية والمعادن الثقيلة في عينات اللبن قبل المعالجة بالممتزات
تم إجراء الكشف عن الأفلاتوكسين 1M و الأوكراتوكسين أ ، وذلك بعد استخلاصها، باستخدام تقنية كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC) ، وهي تقنية حساسة وموثوقة. وبالمثل ، باستخدام مقياس طيف الامتصاص الذري لفرن الجرافيت ، تم قياس تركيزات الرصاص والكادميوم في عينات اللبن السابق هضمها بالطرقة الحمضية.
قياس السموم الفطرية والمعادن الثقيلة فى عينات اللبن بعد إضافة الممتزات
تم إجراء تحقيقات التجارب بالكامل في درجة حرارة محيطة (25 درجة مئوية). أجريت التجارب بتقسيم حجم عينات اللبن المفحوصة سابقاً إلى ثلاث نسخ (50 مل).
إجراءات الادمصاص بواسطة البنتونيت
تلقت كل عينة لبن 5 جم من البنتونيت. تم بعد ذلك تقليب خليط المادة الصلبة واللبن بقوة بمعدل 40 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة. ثم الطرد المركزي لمدة 5 دقائق عند 3000 دورة في الدقيقة لإزالة البنتونيت.
إجراءات الادمصاص بواسطة نوى التمر
تم تحضير مسحوق من نوى التمر المسحوقة والمحمصة أولا. تم خلط عينات اللبن مع 0.3 جرام من نوى التمر المسحوق المحضر لمدة 60 دقيقة مع التقليب عند 250 دورة في الدقيقة. بعد ذلك ، تمت تصفية العينات للتخلص من أي بقايا من مسحوق نوى التمر المحمص.
إجراءات الادمصاص بواسطة جزيئات الشيتوزان النانوية
تم خلط عينات اللبن مع 0.25 جم من جسيمات الشيتوزان النانوية ، ثم تم تقليبها لمدة 120 دقيقة عند 180 دورة في الدقيقة قبل الترشيح.
بعد ذلك تم قياس تركيزات السموم الفطرية المتبقية (الأفلاتوكسين 1M و الأوكراتوكسين أ) والمعادن الثقيلة (الرصاص والكادميوم) في عينات اللبن المعالجة بواسطة البنتونيت ونوى التمر وجسيمات الشيتوزان النانوية.
توصيف الممتزات
تم تطبيق مطيافية فورييه لتحويل الأشعة تحت الحمراء (FTIR) ، وانحراف الأشعة السينية (XRD) ، والمسح المجهري الإلكتروني (SEM) ، والأشعة السينية المشتتة للطاقة (EDX) ، والمجهر الإلكتروني للإرسال (TEM) لوصف خصائص وتركيب المواد المستخدمة لأمتصاص السموم الفطرية والمعادن الثقيلة.
قياس التركيب الغذائي للبن
تم تقييم بعض مكونات اللبن المغذية (الدهون والبروتينات واللاكتوز) قبل وبعد إضافة المواد الماصة وذلك باستخدام جهاز الميلكوسكان. وذلك لدراسة تأثير البنتونيت ونوى التمر و جزيئات الشيتوزان النانوية على الخواص الكيميائية للبن.
دراسة تأثير البنتونيت ونوى التمر وجسيمات الشيتوزان النانوية على كريات الدم الحمراء
أجريت التجربة بالطريقة الموضحة في الآتي:
تحضير كريات الدم الحمراء المعزولة وعلاجها
تم عزل كريات الدم الحمراء من الدم لعشرة أرانب سليمة بالطرد المركزي (عند 3000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق). ثم تمت إزالة البلازما. تم غسل كرات الدم الحمراء ثلاث مرات: مرة واحدة في محلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9 ٪ ومرتين في محلول الفوسفات العازل المثلج PBS (الرقم الهيدروجيني 7.4) ، تم إعادة تعليق كريات الدم الحمراء المعبأة في تخفيفات PBS 1: 9 لإنتاج نسبة 10 ٪ من الهيماتوكريت. تم إنشاء سبع مجموعات من 10 ٪ من كرات الدم الحمراء التى تم تجهيزها من نفس الأرنب:
المجموعة الأولى :وهى المجموعة الضابطة وهى عبارة عن كرات الدم الحمراء التى تم تحضيرها. المجموعة الثانية : تم تخفيف كرات الدم الحمراء بتركيزات منخفضة من البنتونيت (0.6 مجم / مل). المجموعة الثالثة : معلق من كرات الدم الحمراء يتعرض لتركيز عالٍ من البنتونايت (1 مجم / مل). المجموعة الرابعة : معلق كريات الدم الحمراء مع خلاصة نوى التمر ، بتركيز منخفض 50 ميكروغرام / مل. المجموعة الخامسة: معلق كريات الدم الحمراء مع خلاصة نوى التمر بتركيز عالٍ يبلغ 1000 ميكروجرام / مل. المجموعة السادسة: تعليق كريات الدم الحمراء مع جزيئات الشيتوزان النانوية بتركيز منخفض قدره 0.25 مجم / مل. المجموعة السابعة: معلق كريات الدم الحمراء مع جزيئات الشيتوزان النانوية بتركيز عالٍ قدره 1 مجم / مل. تم تحضين المجموعات المختلفة لمدة 4 ساعات عند 37 درجة مئوية. تم إجراء العديد من الاختبارات بعد إجراءات الحضانة ، بما في ذلك قياس الهيموجلوبين ، ومقايسة انحلال الدم ، ومقياس الهشاشة الاسموزى ، والمؤشرات الحيوية المؤكسدة ومضادات الأكسدة المالونالدهيد (MDA) ، الجلوتاثيون المختزل (GSH) ، سوبر أوكسيد ديسميوتيز (SOD) ، و الكاتاليز (CAT) ، وكذلك التغيرات المورفولوجية في كرات الدم الحمراء.
النتائـــــــــج المتحصل عليها:
أوضحت النتائج التحليلية أن تركيز الأفلاتوكسين 1M في عينات اللبن يتراوح بين 4.5 إلى 502 نانوغرام / لتر في 23 عينة (65.7٪) من العينات التي تم فحصها. وكذلك الأوكراتوكسين أ في 9 (25.7٪) من عينات اللبن وتراوحت في التركيز من 1.45 إلى 301 نانوغرام / لتر. فيما يتعلق بالرصاص والكادميوم ، أظهرت النتائج أن 94.3٪ من عينات اللبن تحتوي على الرصاص في المدى من 0.008 إلى 0.644 مجم / كجم وتراوحت الكادميوم من 0.001 إلى 0.095 مجم / كجم في 71.4٪ من العينات التي تم فحصها.
وأوضحت الدراسة أن كفاءة البنتونيت ونوى التمر وجسيمات الشيتوزان النانوية للحد من الأفلاتوكسين 1M كانت (68 ، 56 ، 12٪) ، والأوكراتوكسين أ كانت (64 ، 52 ، 10٪) ، والرصاص كانت (84 ، 97 ، 82٪) وكذلك الكادميوم كانت بنسبة (88 ، 93 ، 98٪) على التوالي ، دون التأثير على المكونات الكيميائية للحليب (الدهون ، البروتين ، اللاكتوز). من الملاحظ أن توصيف هذه الممتزات عبر FTIR و XRD و SEM و EDX و TEM كشف عن مكوناتها الكيميائية ومجموعاتها الوظيفية الحالية التي تفسر قدرتها على امتصاص تلك الملوثات.
أظهرت فحوصات كريات الدم الحمراء في المختبر أن التركيزات العالية لمركبات البنتونيت ونوى التمر وجسيمات الشيتوزان النانوية تؤدي إلى إجهاد تأكسدي، والذي تمت الإشارة إليه من خلال زيادة MDA وانخفاض في GSH و SOD و CAT ، مما يؤدي إلى انخفاض الهيموجلوبين ، وانحلال الدم ، وزيادة سلوك الهشاشة الاسموزى ، وتغيرات شكلية فى كرات الدم الحمراء. على العكس من ذلك ، كان للتركيزات المنخفضة لهذه المواد تأثير ضئيل أو معدوم على كرات الدم الحمراء.
الخــــــــــــــــــــــــــــــــلاصة:
أظهرت النتائج النهائية أن إزالة السموم الفطرية والمعادن الثقيلة الخطرة من اللبن الملوث قد تحسنت بشكل كبير عن طريق استخدام البنتونيت ونوى التمر وجسيمات الشيتوزان النانوية، مع قدرة امتصاص محدودة لجسيمات الشيتوزان النانوية تجاه السموم الفطرية. علاوة على ذلك ، تعتبر هذه المواد غير ضارة بجرعات منخفضة ولكنها خطرة أو مؤكسدة في كريات الدم الحمراء بتركيزات عالية.
التوصيــــــــــــــــــــــــــــات :
من الضروري مراقبة الأعلاف ومياه الشرب والبيئة عن كثب وذلك للحد من تواجد السموم الفطرية وكذلك المعادن الثقيلة فى الألبان وغيرها من الملوثات التى لها العديد من العواقب الصحيه الخطيرة وكذلك تأثيرها على الأمن الغذائى.
نوصي مصانع الألبان بالفحص الدورى للألبان ومنتجاتها وذلك لرصد مستويات السموم الفطرية والمعادن الثقيلة فى الألبان التى تطرح فى الأسواق وضمان انخفاضها إلى أدنى حد، وامتثالها للمستويات القصوى والشروط والتشريعات على الصعيدين الوطني والدولي.
فى حالة تواجد السموم الفطرية فى الألبان وتحديداً الأفلاتوكسين 1Mو الأوكراتوكسين أ نوصى باستخدام البنتونيت وكذلك نوى التمر وذلك لما لهما من قدرة وكفاءة عالية على امتصاص هذه الملوثات دون التاثير على الخصائص الكيميائيه للبن.
اما فى حالة تواجد المعادن الثقيله مثل الرصاص والكادميوم فى الألبان نوصى باستخدام نوى التمر او جزيئات الشيتوزان النانوية التى اثبتت كفائتها على امتصاص هذه المعادن دون التأثيرعلى مكونات اللبن.