Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
The Possible Role of Orthoboric Acid
on Adipogenesis In Rats (In Vitro and In Vivo Models)
Histological and Immunohistochemical Study
/
المؤلف
Hasan,Reda Ahmed Hasan
هيئة الاعداد
باحث / رضــا أحمـد حسـن حسـن
مشرف / سمير نيروز ابراهيم
مشرف / محمد عبد الرحمن احمد مكاوى
مشرف / منى حسين رأفت احمد
تاريخ النشر
2021
عدد الصفحات
239 p :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
علم الأنسجة
تاريخ الإجازة
1/1/2021
مكان الإجازة
جامعة عين شمس - كلية الطب - histology
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 239

from 239

Abstract

ABSTRACT
Background: obesity is a worldwide problem which leads to increased morbidity and mortality. Clinical use of some therapeutic options for the prevention of overweightness is limited due to their dangerous side effects. Orthoboric acid is a new safe and beneficial treatment for prevention of high fat diet induced obesity. Aim: study the effect of orthoboric acid on adipogenesis in vitro and in vivo. Materials and methods: Fifty adult male albino rats were included in this study: Thirty rats for experimental grouping of average weight 200-250 gm. Ten rats for preparation of bone marrow derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs). Ten rats for preparation of platelet rich plasma (PRP). The experiment has been carried out In vitro and In vivo: 1. In vitro group (group I): This group was subdivided into three subgroups: Subgroup Ia (negative control): consisted of 15 × 104 BM-MSCs which was seeded in each well of 6-well culture dishes and treated with 5% fetal bovine serum (FBS) for 8 days. Subgroup Ib (positive control) “platelet lysate (PL) treated”: consisted of 15 × 104 BM-MSCs which was seeded in each well of 6-well culture dishes and treated with 10% PL at the same time of seeding for 8 days. Subgroup Ic (Orthoboric acid treated): It consisted of 15 × 104 BM-MSCs which was seeded in each well of 6-well culture dishes and treated with 10% PL concomitantly with 1 mg/mL orthoboric acid at the same time of seeding for 8 days. After 8 days, cells were fixed with 4% paraformaldehyde and stained with 0.1% Oil Red O staining. 2. In - vivo group: The rats were divided into 4 main groups. group II (control) Subgroup IIa (control 8 weeks), IIb (control 12 weeks). group III (High Fat Diet ′′HFD′′ group): IIIa (HFD 8 weeks), IIIb (HFD 12 weeks). group IV (HFD and orthoboric acid group) for 8 weeks. group V (HFD for 12 weeks but starting from the 8th week the rats were given orthoboric acid daily for 4 weeks). Orthoboric acid was used at dose of 2.5 mg/rat given orally via intragastric tube. Body weights of all rats were recorded weekly during the experiment. Adipose tissues specimens were collected at the end of experiment and processed for H&E, oil red O stain and antiβ - catenin immunohistochemistry. Histomorphometric and statistical analysis were also done. Results: 1. In vitro group, subgroup Ib showed conformational change from spindle shaped fibroblast like cells into spherical shaped cells (adipocytes) with significant increase in its leptin concentration compared to subgroup Ia. Meanwhile, subgroup Ic maintained their fibroblast like shape and showed a significant decrease in leptin concentration compared to subgroup Ib. 2. In - vivo group, group III showed a significant increase in body weight and in size of adipocytes compared to group II. Meanwhile, group IV and group V showed a significant decrease in body weight and size of adipocytes relative to group III. As regard effect of orthoboric acid on adipogenesis, group IV and group V showed positive immunohistochemical reaction for β- catenin with subsequent decrease in lipid accumulation confirmed with less optically dense oil red O staining compared to group III. Conclusions: Orthoboric acid inhibited PL induced adipogenesis in BM-MSCs. Moreover, low dose of oral orthoboric acid was able to reduce body weight in rats and decrease mean size of adipocytes and mean optical density of oil red O together with increase in mean optical density of β- catenin. Therefore, it can be considered as a suitable treatment for obesity due to its vital role in inhibition of adipogenesis.
تعد السمنة من الأمراض التي تصيب المجتمع بكافة مستوياته وترتبط في الغالب بالعديد من الأمراض مثل مرض السكري وأمراض القلب والأوعية الدموية والسرطان ، وقد تؤدي أحيانًا إلى ارتفاع معدل الوفيات. يمكن الوصول إلى السمنة عندما يتجاوز مؤشر كتلة الجسم 30 كجم / م 2 وتعتبر السمنة في البطن إذا تجاوز محيط الخصر 102 سم للرجال و 88 سم للنساء. من المعروف أن الأنسجة الدهنية تتوسع عبر طريقتين رئيسيتين ، تضخم مما يعني زيادة في حجم الخلايا الدهنية الموجودة بالفعل و فرط التنسج مما يعني زيادة تكوين الخلايا الشحمية من خلال تمايز السلائف المقيمة المعروفة باسم الخلايا الأولية. يتم تحديد عدد الخلايا الشحمية في كل مستودع في وقت مبكر من الحياة ويكون مستقرًا في الغالب خلال مرحلة البلوغ ، ومع ذلك فقد ثبت أن تناول النظام الغذائي عالي الدهون لفترات طويلة يمكن أن يساهم في ظهور خلايا شحمية جديدة بسبب تمايز الخلايا الدهنية السلفية والتي تكون شبيهة بالأرومة الليفية وتوجد حول الأوعية الدموية.
تعتبر مركبات البورون من العناصر الغذائية الأساسية للثدييات والتي يمكن العثور عليها في عدة أنواع من الأطعمة ، بما في ذلك الفواكه والمكسرات والمشروبات ومنتجات الحبوب. توجد مركبات البورون في الطبيعة في شكلين: حمض الأورثوبوريك و والبوراكس. يعد حمض الأورثوبوريك حمض غير عضوي ضعيف له خصائص مطهرة ، وقد استخدم حمض أورثوبوريك كمكمل غذائي لفقدان الوزن على المدى القصير والمدى الطويل في نماذج الفئران الحية، علاوة على ذلك يعتبر حمض الأورثوبوريك عاملاً محتملًا لتثبيطً تكوين الدهون في الخلايا السلفية في المختبر .
الهدف من الدراسة الحالية هو دراسة تأثير حامض الأورثوبوريك على تكوّن الدهون في المختبر وفي الجسم الحي.
أجريت التجربة في المختبر وفي الجسم الحي.
في هذه الدراسة ، تم ادراج خمسين فأرًا بالغًا من ذكور الجرذان البيضاء:
تم استخدام ثلاثين من ذكور الجرذان البيضاء البالغة والتى تزن 200-250 جم في هذه الدراسة للتجميع التجريبي. كما تم استخدام عشرة ذكور من الجرذان البيضاء وزنها 80-100 جرام لتحضير الخلايا الجذعية المشتقة من نخاع العظم بالاضافة الى استخدام عشرة ذكور من الجرذان البيضاء وزنها 80-100 جم لتحضير البلازما الغنية بالصفائح الدموية.
1- مجموعة المختبر (المجموعة الأولى):
تم استخدام عشرة فئران من ذكور الفئران البيضاء بمتوسط وزن 100 جرام كمصدر لنخاع العظام حيث تم استخراج الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من نخاع العظم وبذرها في 6 أطباق لزراعة الخلايا. تم تقسيم هذه المجموعة إلى ثلاث مجموعات فرعية:
المجموعة الفرعية ا : (الضابط السلبي): تكونت من عدد 15 × 104 من الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من نخاع العظم وتم زراعتها فى كل طبق من أطباق زراعة الخلايا ومعالجتها بـ 5٪ من مصل بقري جنيني لمدة ثمانية أيام.
المجموعة الفرعية ب: (الضابط الإيجابي) (مجموعة محلول الصفائح الدموية) : تكونت من 15 × 104 من الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من نخاع العظم وتم زراعتها فى كل طبق من أطباق زراعة الخلايا ومعالجتها بنسبة 10٪ من محلول الصفائح الدموية فى نفس وقت البذر لمدة ثمانية أيام.
المجموعة الفرعية ج: (المعالجة بمحلول الصفائح الدموية + حمض الاورثوبوريك): تكونت من 15 × 104 من الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من نخاع العظم وتم زراعتها فى كل طبق من أطباق زراعة الخلايا ومعالجتها بنسبة 10٪ من محلول الصفائح الدموية بالاضافة الى 1 مجم / مل من حمض الاورثوبوريك فى نفس وقت البذر ثم تُركوا لمدة ثمانية أيام.
بعد ثمانية أيام تم تثبيت خلايا المجموعة