الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 148 |  |  |
| | | from | 148 | | |
Abstract
يعد الاستزراع السمكى من الصناعات الواعدة عالميا, سواء فى مجال الاستزراع البحرى او استزراع اسماك المياة العذبة. ولكن هذه الصناعة تواجه عدة مشكلات التى قد تؤثر على الانتاج العالمى منها الامراض. فقد تؤدى الاصابة بالامراض الى نفوق اعداد كبيرة من الاسماك مما يؤثر بالسلب على الانتاج. كما انه فى بعض الاحيان فان استخدام العلاجات ايضا يعد سلاح ذو حدين؛ فانه من جهة قد يكون غير فعال اقتصاديا او لا يعطى النتيجة المرجوة من تقليل النافق.وحيث ان المناعة هي خط الدفاع الاول ضد الامراض. من اجل ذلك كان لابد من الاهتمام بتعظيم دور المناعة لمواجهة المسببات المرضية وزيادة قدرة الاسماك على المقاومة.ومن ضمن الاسماك المستزرعة التى تشارك بنسبة كبيرة فى اجمالى الانتاج السمكى فى مصر هي اسماك العائلة البورية ومنها سمكة البورى الحر محل الدراسة. وكذلك فان اسماك البورى من احد مصادر الغذاء الهامة لعدة دول منها مصر. ولكن هذه الاسماك لديها مشكلة فى جهازها المناعى؛ خاصة فى مراحل عمرها الاولية. مما ينعكس على مدى مقاومتها للامراض فى هذه الفترة الحساسة من عمرها وتعرضها للنفوق بدرجة كبيرة.تعتبر عديد السكريات الشحمية LPS)) من احد المنشطات المناعية التى تستخدم فى مجال الاستزراع السمكى لزيادة الكفاءة المناعية للاسماك. وذلك لتاثيرها على الجهاز المناعى وتحفيزة للدفاع عن اى هجوم وبالاخص المسببات المرضية البكتيرية. ولكن حتى الان لا يوجد الكثير من المعلومات حول دور LPS فى اسماك البورى الحر من الناحية المناعية. ومن جهة اخرى فانه لا يتوفر دراسات كافية عن التفاعل المناعى لاسماك البورى للمنشطات المناعية. لذا فقد كان الهدف من هذه الدراسة هو إلقاء الضوء حول تاثير LPS على الحالة المناعية لاسماك البورى الحر فى مراحله الاولية من خلال تتبع بعض الاستجابات المناعية على خلايا الدم البيضاء؛ بروتينات الدم و مضادات الاكسدة وكذلك الجينات المناعية.وبناءا عليه فقد صممت التجربة حيث تم استخدام 240 اصبعية بورى حر وزن (9 ± 0.5 جم) من مزرعة أسماك خاصة في محافظة كفر الشيخ , خلال الفترة من نوفمبر 2016 إلى ديسمبر 2016 و تم نقل السمك بحاله جيدة إلى قسم الكيمياء الحيوية - كلية الطب البيطري - جامعة كفر الشيخ.- تم أقلمت الأسماك في الاحواض الزجاجية لمدة أسبوعين قبل إجراء التجربة - تم تقسيم الأسماك إلي أربع مجموعات كل مجموعة تحتوي علي 60 سمكة .- تم حقن ألاسماك من خلال الغشاء البريتوني بجرعات مختلفة من مادة عديد السكريات الشحمية (LPS) او المحلول الملحي لمرة واحدة كالأتي:مجموعة ( أ ) تم حقنها بالمحلول الملحي (المجموعة الضابطة).مجموعة ( ب ) تم حقنها بمادة عديد السكريات الشحمية بجرعة (1ميكروجرام /كيلو جرام من وزن الاسماك).مجموعة ( ج ) تم حقنها بمادة عديد السكريات الشحمية بجرعة (10ميكروجرام /كيلو جرام من وزن الاسماك).مجموعة ( د ) تم حقنها بمادة عديد السكريات الشحمية بجرعة (100ميكروجرام /كيلو جرام من وزن الاسماك).تم تجميع العينات من الاسماك التى تم حقنها على فترات مختلفة (6, 12, 24, 48 و أسبوع بعد الحقن) تمثلت العينات فى: عينات للدم والتى اخذت على مانع للتجلط لاستخدامه فى عد كريات الدم البيضاء وحساب معدل H/L ؛ عينات الدم وذلك للفصل الكهربائي لقياس البروتينات في المصل. انسجة الكبد والتى تم تقسيمها إلي جزأين:-جزء تم حفظه فى درجة حرارة 20 درجة مئوية لقياس الإنزيمات المضاده للأكسدة.2-والجزء الثاني تم حفظة فى درجة حرارة 80 درجة مئوية لاستخلاص RNA ولقد خلصت النتائج للتالى:- استخدام LPS عن طريق الحقن فى اصبعيات البورى الحر ادى الى زيادة معنوية فى كريات الدم البيضاء المختلفة وكذلك H/L ratio مقارنة بالمجموعة الضابطة. مع وجود علاقة طردية بين الجرعة والفترة ما بعد الحقن. كما وجد زيادة معنوية فى اعداد خلايا الليمفية .لوحظ انخفاض معنوى فى الانزيمات المضادة للاكسدة فى انسجة الكبد.ادىLPS الى زيادة معنوية فى جزيئات بروتين الدم مع ظهور واضح للبروتينات ) البري البيومين، البيومين ، الفا جلوبين ، بيتا جلوبين وأخيرا الجاما جلوبين ( عند إجراء الهجرة الكهربائية باستخدام جهاز الفصل الكهربائى.ادى LPS الى زيادة معنوية فى بروتين الجاما جلوبين فى مصل الدم.حدوث زيادة معنوية فى مستوي التعبير الجينى لكل من جينات انترلوكين 1 بيتا ; انترلوكين 8 انترلوكين 10 واخيرا تنخر الورم الفا فى الاسماك المحقونة ب LPS مقارنة بالمجموعة الضابطة. حيث واصل جين انترلوكين 1 بيتا زيادة تعبيره الجينى فى كل الجرعات المختلفة (1, 10 , 100 ميكروجم/ كجم من وزن السمكة) مع اعلى معدلاته 24 ساعة بعد الحقن. ولكن التعبير الجينى انترلوكين 8 كان متذبذب بين الزيادة والانخفاض. وقد لوحظ نفس السلوك فى التعبير الجينى لكل من انترلوكين10 و تنخر الورم الفا وبناءا عليه فانه يمكن الاستنتاج بان الجرعة (10 ميكروجرام/كجم من وزن السمكة) هي الافضل من حيث الاستحثاث على مستوى خلايا الدم وكذلك التعبير الجينى لجينات السيتوكين.الخلاصة:-باعتبار ان المنشطات المناعية مهمة للإنسان وكذلك الحيوان فهي أيضا مهمة للأسماك , لذلك تعتبر هذه الدراسة هي خطوة أولية لفهم بعض الآليات وراء إثارة الجهاز المناعي بعد حقن LPS في البوري. يمكننا أن نستنتج أن LPS ( جرعة من 10 ميكروغرام / كجم) من وزن الأسماك كان المغير الاقوي وكان كافيًا لإثارة الاستجابة المناعية على مستوى التعبير الجيني وإنتاج جلوبينات المناعة.التوصيات والخطط المستقبليه:-• نوصي باستخدام جرعات منخفضة من عديد السكريات الشحمية لتعزيز الاستجابة المناعية في الأسماك بشكل عام والبوري بشكل خاص. وبالتالي توفر هذه الدراسة للباحثين بيانات يمكن استخدامها كأساس لمزيد من الأبحاث.• يوصى بإجراء مزيد من الدراسات حول عديد السكريات الشحمية لمعرفة تأثيره على المناعة في أسماك البوري بالقياسات المناعية الأخرى بعد التحدي المسببة للأمراض.